1 范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了羊人工授精消毒、采精、精液處理、輸精等技術(shù)。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于通遼地區(qū)的養(yǎng)羊(場)戶肉羊的繁殖配種。
2 消毒
2.1 器械消毒
假陰道要用清水沖洗,然后用75%的酒精消毒,使用前用生理鹽水沖洗。金屬制品中的開膣器、鑷子、盤子等,用清水沖洗,擦干后用75%的酒精或進(jìn)行酒精燈火焰消毒。
2.2 配種操作室消毒
配種操作室一般面積為15㎡~20㎡,室溫為18℃~25℃。要求地面平整,光線充足,寬敞、平坦、清潔、安靜。日常消毒用1%高錳酸鉀溶液進(jìn)行噴灑消毒,每日于采精前和采精后各進(jìn)行1次。
3 采精
3.1 采精前的準(zhǔn)備
3.1.1器械的準(zhǔn)備:假陰道、集精杯、鑷子、開膣器、輸精器等要提前清洗、干燥、消毒,存放于消毒柜內(nèi)備用。
3.1.2公羊的準(zhǔn)備:種公羊第一次采精的年齡應(yīng)在1.5周歲左右,膘情中等;初次參加采精的公羊,應(yīng)先進(jìn)行采精訓(xùn)練,方法是讓其“觀摩”其它公羊配種;或用發(fā)情母羊刺激性欲。采精調(diào)教訓(xùn)練成功后,才能進(jìn)行正式操作。
3.1.3假陰道安裝:安裝假陰道時,先將內(nèi)胎裝入假陰道外殼,再裝上集精瓶,調(diào)節(jié)好調(diào)節(jié)閥鈕。在假陰道內(nèi)胎的前三分之一處涂抹少許滅菌凡士林,從假陰道注水孔注入50℃~55℃溫水150ml,通過氣體活塞吹入氣體,氣體的量一般以內(nèi)胎表面呈三角型合攏而不向外鼓出為事宜。在采精時先測試假陰道內(nèi)溫度,應(yīng)保持在40℃~42℃。
3.2 采精
采精前用溫水洗凈種公羊陰莖的包皮,并擦干凈;將臺羊保定后,引公羊到臺羊處,采精時采精員站立在公羊的一側(cè);當(dāng)種公羊爬跨時,迅速上前,使假陰道靠在母羊臀部,其角度與母羊的陰道的位置相一致(與地面成35~45度角),用手輕托陰莖包皮,迅速將陰莖導(dǎo)入假陰道中;羊的射精速度很快,當(dāng)發(fā)現(xiàn)公羊有向前沖的動作時,即為射精,要迅速把裝有集精瓶的一端向下傾斜,并豎起集精瓶;及時送精液到處理室,放氣后取下集精瓶,蓋好蓋,待精液品質(zhì)檢查。
3.3 采精頻率
成年種公羊每日采精1~2次,連采3天休息1次,初采羊可酌減。
4精液品質(zhì)檢查
4.1 外觀檢查
4.1.1顏色:呈乳白色,肉眼可看到乳白色云霧狀。
4.1.2氣味:無味或略帶腥味。
4.1.3精液量:一次采集量山羊平均為0.8ml~1.0ml,綿羊平均為1.0ml~1.2ml。
4.1.4初檢:經(jīng)外觀檢查,凡帶有腐敗臭味,出現(xiàn)紅色、褐色、綠色的精液判為劣質(zhì)精液,應(yīng)棄掉不用,一般情況下不再做顯微鏡檢查。
4.2 顯微鏡檢查
4.2.1精子活力:精子的活力是指在38℃的室溫下直線前進(jìn)的精子占總精子數(shù)的百分率。檢查時以滅菌玻璃棒蘸取1滴精液,放在載玻片上加蓋玻片,在400~600倍顯微鏡下觀察。全部精子都做直線運(yùn)動評為1級,90%的精子做直線前進(jìn)運(yùn)動為0.9級,以下以此類推。
4.2.2精子的密度:是指每毫升精液中所含的精子數(shù)。取1滴新鮮的精液在顯微鏡下觀察,根據(jù)視野內(nèi)精子多少分為密、中、稀三級。“密”是指視野中的精子數(shù)量多,精子之間距離小于1個精子的長度;“中”是指精子之間的距離大約為1個精子的長度;“稀”為精子之間距離大于1個精子的長度。每毫升精液中含精子25億以上者為密,20億~25億個為中,20億以下為稀。
4.2.3精子質(zhì)量:精子活力在0.6以上,密度在中等以上,畸形精子率不超過20%,為優(yōu)質(zhì)。
5 稀釋、保存
5.1稀釋
5.1.1稀釋液的配制:稀釋液的配方選擇易于精子活動,減少能量消耗,延長精子壽命的弱酸性稀釋液。推薦配方見附錄A。
5.1.2稀釋倍數(shù):要根據(jù)精子密度、活力而定稀釋比例,稀釋后的精液,每毫升有效精子數(shù)不少于7億個。
5.1.3稀釋的操作步驟:根據(jù)鏡檢得出精子密度確定稀釋倍數(shù),根據(jù)稀釋倍數(shù)計(jì)算出應(yīng)加入的稀釋液的量,用量杯量取應(yīng)加的稀釋液。稀釋前將兩種液體置于同一溫水中,然后將稀釋液沿著精液瓶緩緩倒入,為使混合均勻可稍加搖動,稀釋完畢后,立即進(jìn)行活力鏡檢,并將鏡檢結(jié)果填入采精登記表。
5.2 精液保存
5.2.1常溫保存:精液稀釋后,保存在20℃以下的室溫環(huán)境中,一般可有效保存24h。
5.2.2低溫保存:在常溫保存的基礎(chǔ)上,溫度進(jìn)一步緩慢降至0℃~5℃之間??蓪⒕貉b入小試管內(nèi),直接放入溫度為2℃~4℃的恒溫箱中,低溫下一般可有效保存48h~72h。
6發(fā)情鑒定
母羊發(fā)情的主要表現(xiàn):食欲減退、興奮不安、嘶鳴、爬跨其它羊或接受其它羊爬跨而靜立不動;陰門紅腫,頻頻排尿而流出透明的液體;用試情公羊與母羊接觸,母羊表現(xiàn)溫馴,并將后軀轉(zhuǎn)向公羊;將開膣器插入陰道,使之開張,發(fā)情盛期的母羊陰道潮紅、潤滑,子宮頸口開張,分泌的液體呈透明狀。
7 輸精
7.1準(zhǔn)備
7.1.1人員:輸精人員應(yīng)穿工作服,用肥皂水洗手、擦干,再用生理鹽水沖洗。
7.1.2器械:把洗滌消毒好的開膣器、輸精槍、鑷子用紗布包好,待用。
7.1.3母羊:對發(fā)情母羊輸精時,應(yīng)對外陰部進(jìn)行清洗,待干燥后再用生理鹽水棉球擦拭。
7.2方法
用生理鹽水擦拭后的開膣器插入陰道深部,觸及子宮頸后,稍向后拉,以使子宮頸處于正常位置之后,輕輕轉(zhuǎn)動開膣器90度,打開開膣器,開張度在不影響觀察子宮頸口的情況下,開張的愈小愈好(2cm),否則引起母羊怒責(zé),不僅不易找到子宮頸,而且不利于深部輸精;輸精槍應(yīng)慢慢插入到子宮頸內(nèi)0.5~1.0cm處,插入到位后應(yīng)縮小開膣器開張度,并向外拉出1/3,然后將精液緩緩注入;輸精完畢后,讓羊保持原姿勢片刻,放開母羊,原地站立5~10min,再將羊趕走。
7.3 輸精次數(shù)和輸精量
輸精次數(shù):母羊1個情期應(yīng)輸精2次,發(fā)現(xiàn)發(fā)情時輸精1次,間隔8~10個小時應(yīng)進(jìn)行第2次輸精。輸精量:每頭份的輸精量,原精液為0.05ml~0.10ml,稀釋后精液應(yīng)為0.1ml~0.2ml。
7.4其他要求
輸精人員要嚴(yán)格遵守操作規(guī)程,輸精員輸精時應(yīng)切記做到深部、慢插、輕注、稍停。對個別陰道狹窄的青年母羊,開膣器無法充分打開,很難找子宮頸口,可采用陰道內(nèi)輸精,但輸精量需增加1倍。輸精后立即做好母羊配種記錄。每輸完一只羊要對輸精器、開膣器及時清洗消毒后才能重復(fù)使用,有條件的建議用一次性器具。
附錄A
稀釋液推薦配方
配方一:生理鹽水稀釋液。生理鹽水作為稀釋液簡單易行,稀釋后的精液應(yīng)在短時間內(nèi)使用,是目前生產(chǎn)實(shí)踐中最為常用的稀釋液,稀釋的倍數(shù)不宜太高,一般是原精液2倍以下為宜。
配方二:葡萄糖卵黃稀釋液。在100毫升蒸餾水中加葡萄糖3克、檸檬酸鈉1.4克,溶解后過濾3~4次,蒸煮30分鐘后滅菌,降至室溫,再加新鮮卵黃(不要混入蛋白)20毫升,再加青霉素10萬單位震蕩溶解。這種稀釋液有增加營養(yǎng)的作用,可作7倍以下稀釋。